Diagnose af Equine Piroplasmosis
Equine Piroplasmosis (EP) kan diagnosticeres ved
- serologiske test, der påviser sera-antistoffer mod heste-piroplasmer og/eller
- ved molekylære test, der påviser hestepiroplasmer i det cirkulerende blod.
Hver af disse tests har fordele og ulemper afhængigt af Equine Piroplasmosis fase og diagnostisk formål. Når det er sagt, er det tilrådeligt at udføre mindst to forskellige tests for at afgøre Equine Piroplasmosis (EP) smittefrihed.
-
Til diagnosticering Equine Piroplasmosis (EP), til alle formål, tWorld Organization for Animal Health (OIE) anbefaler c-ELISA
og PCR-tests. -> Køb EP-statustest
Se tabel 1 uddrag fra OIE Terrestrial Manual 2018.
-
USA: USDA bestemmer importberettigelsen til EP ved c-ELISA og CFT-testning. Det er de to tests, der er udført hos Imported Equines for Equine Piroplasmosis. Se figur 4 fra VS-vejledning 13407.1 og VS-vejledning 13407.2 dateret 23-12-2020
Figur 4 uddraget fra VS-vejledningen 13407.1/2018.
Piroplasmosetest for heste forklaret
De serologiske tests har høj specificitet og sensitivitet til at påvise kroniske og/eller usynlige infektioner.
Adskillige serologiske test er blevet udviklet for at øge diagnostisk følsomhed, såsom konkurrerende enzym-linked immunosorbent assay (c-ELISA), komplementfikseringstesten (CFT) og det indirekte fluorescerende antistof test (IFAT).
c-ELISA
Siden 2004 er c-ELISA betragtet guldstandarden metoden til påvisning af kroniske eller medfødte faser.
Denne test er rapporteret som den mest følsomme test for kronisk eller usynlig infektion, der detekterer serokonversion 21 dage efter infektion.
- Verdensorganisationen for dyresundhed (OIE) og United States Department of Agriculture (USDA) godkendte c-ELISA (VMRD® Inc., Pullman, WA, USA) som en af de regulatoriske test for screening af heste for både Babesia caballi og Theileria equi før international transport til ikke-endemiske nationer.
- c-ELISA for Babesia caballi og Theileria equi har en sensitivitet på 95,0 % og 100 % og en specificitet på henholdsvis 99,5 % og 100 %.
- c-ELISA har mere følsomhed end CFT og IFAT.
- c-ELISA kan kun påvise Piroplasmose efter 21 dage efter infektion.
CFT
Komplementfikseringstesten (CFT) er tidligere blevet brugt af nogle lande og er stadig meget brugt i nogle regioner, nemlig i USA, for at kvalificere heste til import.
- CFT er nøjagtig til påvisning af tidlige (akutte) infektioner til hvilket formål den viser god sensitivitet og specificitet.
- CFT detekterer piroplasmose 8 til 11 dage efter infektion.
- CFT er en meget specifik test, men mangler følsomhed i kroniske og usynlige faser af infektion;
- Derfor bør CFT kun anvendes i tilfælde af akut infektion.
IFAT
Den indirekte fluorescerende antistoftest (IFAT) det er den supplerende test, når resultater opnået ved c-ELISA og CFT er inkonklusive. Denne test viser høj specificitet, men mangler sensitivitet.
- IFAT kan detektere serokonversion 3 til 20 dage efter infektion
- Eksperimentelle infektionsundersøgelser har vist, at et bredere interval for påvisning af tidlige infektioner.
- En udfordring med IFAT er behovet for at fortynde sera for at reducere ikke-specifik binding og efterfølgende baggrund, hvilket kan udelukke identifikation af intra-erythrocytiske parasitter og mindske følsomheden af denne test.
Identifikation af agenten
qPCR
Kvantitativ PCR (qPCR) er en molekylær eller DNA-baseret diagnostisk teknik, der bruges til at påvise parasittens DNA i cirkulerende blod.
- qPCR-teknikker er de mere følsomme teknikker end nogen andre metoder og er bedst til diagnosticering af dyr ved tidlige (akutte) infektioner og ved kroniske-infektioner.
- Det er imidlertid blevet påvist, at efter behandling kan dyret være qPCR-negativt, men c-ELISA-positivt i 24 måneder efter clearance af parasitten.
.